光学显微镜有景深对于CCD 影像 z 轴拍摄清晰度的影像
CCD 影像的 z 轴间距与显微物镜之聚焦深度的关系一般光学显微镜有景深(Depth of Field)的缘故,
显微物镜的聚焦深度(Depth of Focus)为 3.5 微米,亦即待测物在景深
范围内,CCD 摄影机皆能撷取到聚焦清晰的影像。
所用到的聚焦度计量法则,主要是根据 CCD 摄影机所撷取影像中的像素
灰阶值变化剧烈的程度,来判别是否在焦平面上,所以若影像的 z 轴
间距小于景深,对同一 CCD 像素而言,在景深范围内的灰阶强度值
较无剧烈的变化,导致重建出来的结果较差;
若影像的 z 轴间距大于景深,即我们不是以上下间隔 3.5 微米的影像,来求得每层影像中的
焦平面区域,而是以上下间隔 7 微米的影像,来推得每层影像中焦平
面的区域,重建出来的结果,CCD 重複撷取影像 90 张再取其平均值,影像张数共 23 张,
重建的演算法则为最小相邻反捲积。
可以察知当影像间距大于景深时,虽然影像中灰阶强度剧烈地变化,但相对地 z
轴解析度就不好,当然重建出来的待测物三维表面结果,其整体解析度就较差,
显微物镜的规格,来决定影像间的 z 轴间距,故本文第四章节所重建的结果,其影像间的 z 轴间距
大小为显微镜物镜焦深 3.5 微米,使得 CCD 在撷取影像过程中,能同
时兼顾到影像中灰阶强度变化的程度与 z 轴解析度
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