电泳仪器的组成以及脂类层析分离实验-生物显微镜在许多方面薄层层析与纸层析相象,但它可以使用多种 材料甚至混合物作为支持基质,这是它的优点。在支持基质 中可以加入荧光染料以助鉴定斑点。根据所用支持物的性质,分离的机制可以是吸附层析,离子交换层析,分配层析或 凝皎过滤。这种方法非常快速,许多分离能够在1小时内完 成。斑点非常致密,有可能&出在纸上查不出昀低浓度化合脂类的薄层层析分离原理生物材料中的脂质是复杂的混合物,先用溶剂提取把它 们分成若千组,然后用薄层层析把每一组中的各种成分分开。 根据所研究的脂类选择溶剂,但一般地说,中性脂质用非极性 溶剂,带有电荷的脂质用极性溶剂。许多支持基质皆可用于 脂类的分离,选择吸附剂时的主要根据是要分离那一组的脂 质和使用什么样的溶剂。用得最多的是硅胶,其分离的机制 是吸附作用和分配作用。在下面实验里,脂类依极性分组,每组里包括有一些代表 性的标准品。对一些天然油脂进行检査,以确定其成分。电泳仪器 电泳仪器由两个电极槽构成。电泳支持物 通过滤纸或纱布垫和两槽相连。每一电极榷都分隔成两室, 两室之间由棉花条或石棉条沟通。其中一室安装有白金电 极,另一室和电泳支持物接触。由于电泳时电极附近的PH 会发生变化,就是使用有缓冲能力的溶液也是如此,所以将电 极槽分隔成两室,以保证在电泳支持物附近pH的变化减少 到最低程度。电泳支持物和绥冲液之间,则是依靠几层用缓 冲液饱和的 3MM滤纸或纱布接通的。做这种连 接时,应使这段距离上的电势降很小。
|