解像力(resolution)(R)
◎辨别两点最小距离又称解析度,解像力越小越好
◎R﹦0.61 / n*Sin ﹦0.61/ NA,为波长
◎R越小越好,因此越小越好(EM比LM 解像力好)
◎LM(油镜),R﹦0.61/1.41﹦0.61*5000A(白光500 nm)/1.41=0.2 m
◎EM,=0.535A,R﹦0.001 m (1 nm)
◎ NA越大,解像力越好,因此油的解像力较好
放大倍率
◎M﹦MoXMeX(Mi=1)
◎M应为NA值的400-1000倍
焦深
◎对焦平面上下一段距离内的平面,检体亦呈清晰影像,此一距离称之
◎受NA影响很大
◎D=2-(NA)2/(NA)2,为波长
◎低倍物镜有较大焦深(表1-1)
◎油镜焦深较短
工作距离
--物镜镜头顶端至检体间的距离
--放大倍率越小,工作距离越长
相差
◎显微镜形成的影像与精美影像的偏差
1、球面相差(视野中央影像清楚,周边影像模糊—未对焦)
*可用平面物镜(plan objective)校正
*常出现高倍物镜使用时,盖玻片厚度不对所致
2、色相差(不同颜色因折射率不同,因而聚焦在透镜不同的地方)
*红色波长较长,折射率大,聚焦较远
*产生不同颜色的同心圆
*视野边缘影像会被红边包围称之侧色相差
*可用多重透镜校正,此透镜称为消色相差物镜(a-chromaticor apo-chromatic objective)
3、弯曲相差
*球面相差严重时产生弯曲影像
4、扭曲相差
*周边和中央放大倍率不同造成
5、散光相差
*影像无法聚焦成一个点
*镜头制作不良所致
6、彗星云状相差
*光线透过透镜时不与光轴平行
*影像无法聚焦成一个点
*镜头制作不良所致
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