相差显微镜较普通显微镜增加的结构
相位差显微镜 (Phase Contrast Microscope):
1.相位差显微镜的结构:
相位差显微镜,是应用相位差法的显微镜。因此,比通常的显微镜要增加下列附件:
(a).装有相位板(相位环形板)的物镜,相位差物镜。
(b).附有相位环(环形缝板)的聚光镜,相位差聚光镜。
(c).单色滤光镜-(绿)。
2.功能说明如下:
(a).相位板使直接光的相位移动90°,并且吸收减弱光的强度,工具显微镜,在物镜后焦平面的适当位置装置相位板,相位板必须确保亮度,为使衍射光的影响少一些,相位板做成环形状。
(b).相位环(环状光圈)是根据每种物镜的倍率,而有大小不同,可用转盘器更换。
(c).单色滤光镜係用中心波长546nm(毫微米)的绿色滤光镜。通常是用单色滤光镜入观察。相位板用特定的波长,移动90°看直接光的相位。当需要特定波长时,必须选择适当的滤光镜,滤光镜插入后对比度就提高。此外,相位环形缝的中心,必须调整到正确方位后方能操作,对中望远镜就是起这个作用部件。
大部分的细胞在显微镜下呈透明的,故需染色
使用时注意事项:
使用时,最重要的注意事项为下列三点:
(a).执行正确的操作方法。
正确操作的最重要事项必须正确地调整好相位环的中心。
(b).根据标本的要求,选择合适的相位差物镜。
(c).用其他观察方法作比较,对标本作出正确的判断。
解像力 原理
裸眼 100μm 人类的眼睛可以看清物体的范围,有一定的距离,其范围两端分别称为眼的远点和近点。 眼睛的近点随着年龄而异,通常正常人的明视距离约为25公分,如物体移到近点内,则显得模煳不清楚。
光学显微镜Optical Microscope 0.2μm
(1).解像力有先天的限制,因此无法看到小于小细菌细胞之直径以下的细部构造。
(2).由于大部分的细胞在显微镜下呈透明的,故需染色。
(3).增加光学显微镜影像的明暗对比的方法很多,例如利用染色法处理样本,或在显微镜上附加特殊装置例如位相差显微镜、暗视野显微镜、干涉显微镜、偏光显微镜、X光显微镜、萤光显微镜、紫外光显微镜 等。
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