荧光显微镜一次PCR反应检测到数种菌株的技巧
一般来说3-4重PCR要考虑的因素非常多,一句话:难上加难
第工一种方法:
理想化的模型,必须基于以下特点:
1)2-3个待测试菌株有合适区域设计的通用引物
2)在上下游引物之间的顺序需有差异,而且差异需有各自特异性探针的设计。
想一次同时操作,需要设计出来的2-3条探针的TM值,需等于且高出引物5-10度,
其中难度非常大但是也不是不可能
第二种方法:
操作性会可操作些。但是需要细心和细致,需要用目的菌基因模板,
用一样的引物和探针设计原则(Primer Express设置除扩增长度外,其他的必须是相似参数)
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