掌握荧光显微镜性质根据ELISA的原理,对细胞复染的技巧
一般要根据荧光显微镜的原理和性质来确认使用的激发块类型
1)荧光原理是用短波长的光去激发标本,标本产生长波长的荧光。在光谱上, 461nm是蓝色光,530nm是绿色光
345nm是近紫外光(肉眼看不见)。
2)DAPI染料染细胞核,应使用激发波长359nm的紫外光去激发,选择吸收波长461nm的滤色镜来观测蓝色荧光。
3)染细胞质的绿色染料就该用激发波长345nm的近紫外光去激发,选择吸收波长530nm的滤色镜去观察绿色荧光。
4)需明白你所使用的荧光激发块,一般情况下荧光显微镜激发块有窄带和宽带两种。
(1)如你所用的近紫外激发块是宽带的,那么在荧光显微镜下应可以同时看到蓝色的细胞核和绿色的细胞质;
如只看到绿色细胞质,就很可能是你的激发块选择错误,你也许选择了蓝光激发,所以只能看见绿色的细胞质。
(2)如你所使用的近紫外激发块是窄带的,无论怎样你将只能看到蓝色或绿色其中一种,看主要看选什么波长激发。
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