首先是这样在倒置显微镜挑克隆的细胞的
1 让单克隆细胞长到比较大的集落大概100个左右吧,在倒置显微镜下用标记笔在孔板底标出待挑克隆的位置---就是一个小黑点。
2 吸取培基用D-Hanks洗后有两种挑法。
第工一是胰酶消化法:方法是用10ul的移液枪吸取大概6ul左右的胰酶滴在标记的黑点(单克隆)上面,大概10秒钟后,
用移液枪吸取胰酶反复吹打几次,将胰酶消化产物移入24孔板中。
第二种方法与挑细菌的单克隆有点相似,用一个200ul tip头对着标记的黑点直接刮取,将刮取产物移入24孔板中。
挑完后于倒置显微镜下观察集落转移情况。个人总结觉得第工一种方法较好!
在显微镜下用记号笔从下面就可以标记出你的克隆的位置;
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