选购荧光显微镜选购滤光片指导说明
首先在做实验事前研究人员会先确定所用染料然后选择荧光激发块。
缘由:
1、做实验之前通常都已经查阅了大量的文献资料,然后根据参考文献你知道哪几种染料可以用在你将要实验的标本上,再从中挑选最适合你的实验设计的染料,选定了染料之后再确定你要使用的荧光激发块;
2、另外,你所说的红光或绿光其实是指荧光的发射光的颜色,根据荧光的原理:荧光的产生是由于某些物质的分子受到光刺激之后发生了能级变化,即分子中的原子受到光刺激后(吸收了能量)从低能级状态跃迁到高能级状态,由于高能级状态很不稳定,很容易回到低能级状态,根据能量守恒定律,从高能级状态回复到低能级状态的时候必然有能量的释放(以辐射的形式),因此就有光的产生,这种光就是我们通常说的荧光。所以荧光的产生简单地说就是stroke法则:短波长的光激发产生长波长的光。这就是通常我们说的紫外激发产生蓝光,蓝光激发产生绿光,绿光激发产生红光。所以如果你用的染料是DAPI(发蓝光),你就要选用紫外激发块,如果你选择GFP(绿光),你就要选用蓝色激发块以此类推。
荧光显微镜与普通显微镜的区分有三个不同点:
1.照明方式是为落射式,即光源通过物镜投射于样品上;
2.光源为紫外光,波长较短,分辨力是高出普通显微镜;
3.有两个滤光片,一个滤光片用于滤除可见光,目镜和物镜之间的滤光片用于滤除紫外线,保护眼睛。
荧光显微镜其实同是属于光学显微镜这个类别的,主要的不同在于是二者的激发波长区别。造成荧光显微镜与普通光学显微镜组成结构和操作方式的不同。
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