使用活细胞成像技术在生物医学研究的爆炸性增长已推动相结合的活动，包括在共聚焦显微镜仪器戏剧性的进步，再加上引进新型超灵敏探测器和持续改进的荧光蛋白基因编码的性能。揭示复杂的生物动力学的毫秒时间尺度上的活细胞中获取本地化的荧光图像，提出了新的挑战的主机，这是远远超过传统创建一个单一的高分辨率染色的固定组织的快照。

为了保证高图像采集速度和合理的对比度和最小的漂白活细胞荧光蛋白的合成染料，显微镜必须能够快速扫描领域的观点和记录数据使用探测器量子效率高。

激光扫描共聚焦显微镜的重点单梁试样的平面上，依次指向扫描的利益与地区发射光的空间过滤，拒绝来自重点地区的光通过一个单一的针孔。